Arnt 2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-403101
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Arnt 2 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im Arnt 2-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Arnt 2: sc-393683
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Arnt 2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) | sc-403101 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
ARNT2 (aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator 2) kodiert einen bHLH-PAS-Transkriptionsfaktor, der mit Partnern wie Mitgliedern der HIF-Familie Heterodimere bildet, um stimulusabhängige Genexpressionsprogramme zu regulieren. Arnt2 trägt zu Sauerstoffsensorik- und entwicklungsbezogenen Transkriptionsnetzwerken bei, indem es die DNA-Bindung an Hypoxie-Response-Elementen unterstützt und eine chromatinabhängige Kontrolle von Ziel-Loci koordiniert. Es ist besonders relevant für Studien zur neuronalen Differenzierung und zur zellulären Anpassung an metabolischen oder umweltbedingten Stress, bei denen die ARNT2-abhängige Transkription Überleben und linienspezifische Gensignaturen beeinflussen kann. Eine Fehlregulation ARNT2-assoziierter Signalwege wurde mit veränderten hypoxischen Signalantworten und neuroentwicklungsbezogenen Phänotypen in Verbindung gebracht, was ARNT2 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die mechanistische Untersuchung PAS-Domänen-basierter transkriptioneller Schaltkreise macht.
Das Arnt 2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ARNT2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ARNT2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ARNT2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Arnt 2-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ARNT2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Arnt 2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf ARNT2-Exone abzielen, die für die Arnt 2-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere ARNT2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom Arnt 2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Arnt 2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ARNT2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Arnt 2 HDR-Plasmid (h) und Arnt 2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ARNT2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ARNT2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.