Aquaporin 7/AQP7 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-419178
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Aquaporin 7/AQP7 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Aquaporin 7/AQP7, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Aquaporin 7/AQP7 Antibody (D-12): sc-376407
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Aquaporin 7/AQP7 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-419178 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Aqp7 codifica l’acquaporina 7 (AQP7), un’acquagliceroporina che facilita il trasporto attraverso la membrana di acqua e di piccoli soluti neutri, come il glicerolo. Negli adipociti murini, AQP7 contribuisce a regolare l’efflusso di glicerolo durante la lipolisi, influenzando l’utilizzo del glicerolo, l’accumulo di trigliceridi e il bilancio energetico sistemico. La sua attività si integra con programmi di segnalazione metabolica, inclusi i percorsi lipolitici guidati da cAMP/PKA e reti più ampie di omeostasi lipidica. Alterazioni dell’espressione o della funzione di AQP7 sono state associate a fenotipi rilevanti per obesità, insulino-resistenza e accumulo lipidico epatico, a supporto del suo impiego come nodo meccanicistico in modelli di malattie metaboliche.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Aquaporin 7/AQP7 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Aqp7 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Aqp7 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Aqp7 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Aquaporin 7/AQP7.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Aqp7 per lo studio della segnalazione di Aquaporin 7/AQP7, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Aqp7 critici per la funzione di Aquaporin 7/AQP7
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Aqp7 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Aquaporin 7/AQP7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Aquaporin 7/AQP7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Aqp7. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Aquaporin 7/AQP7 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Aquaporin 7/AQP7 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Aqp7 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Aqp7 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.