Adenylate cyclase 10/ADCY10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406235

Descripción general

ADCY10 codifica la adenilato ciclasa 10 (adenilil ciclasa soluble, sAC), una enzima intracelular que genera AMPc en respuesta a señales de bicarbonato y calcio, en lugar de a la activación de receptores acoplados a proteína G. Al modelar microdominios de AMPc, ADCY10 modula la señalización de PKA y EPAC, influyendo en procesos como la función mitocondrial, el transporte iónico, la capacitación espermática y las respuestas de detección de pH. El AMPc derivado de sAC integra señales metabólicas y de equilibrio ácido‑base con redes de fosforilación, afectando programas transcripcionales y la adaptación celular al estrés. La actividad desregulada de ADCY10 se ha investigado en contextos como la infertilidad masculina, el manejo renal y de las vías respiratorias del bicarbonato, y la reprogramación de la señalización de AMPc asociada a tumores, lo que respalda su relevancia para estudios mecanísticos de vías de señalización.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Adenylate cyclase 10/ADCY10 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ADCY10 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ADCY10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ADCY10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Adenylate cyclase 10/ADCY10.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ADCY10 para la investigación de la señalización de Adenylate cyclase 10/ADCY10, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ADCY10 críticos para la función de Adenylate cyclase 10/ADCY10
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ADCY10 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Adenylate cyclase 10/ADCY10 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Adenylate cyclase 10/ADCY10 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ADCY10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Adenylate cyclase 10/ADCY10 (h) y el plásmido HDR Adenylate cyclase 10/ADCY10 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ADCY10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ADCY10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.