ABCF2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406271

Panoramica

ABCF2 (membro 2 della sottofamiglia F delle cassette leganti ATP, ATP-binding cassette) è un’ATPasi solubile della famiglia ABC priva di domini transmembrana e agisce nel citosol come regolatore della traduzione e di processi associati ai ribosomi. È stato collegato al controllo della sintesi proteica in condizioni di stress cellulare e può influenzare la proteostasi modulando le interazioni con il macchinario di traduzione. Attraverso questi ruoli, ABCF2 è rilevante per vie che modellano la crescita cellulare, l’adattamento allo stress e gli output della segnalazione infiammatoria a valle di un controllo traduttivo alterato. Una disregolazione dell’espressione di ABCF2 è stata riportata nel cancro e in altri contesti fisiopatologici in cui il rimodellamento della traduzione e i programmi di risposta allo stress risultano compromessi.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ABCF2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ABCF2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ABCF2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ABCF2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ABCF2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ABCF2 per lo studio della segnalazione di ABCF2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni ABCF2 critici per la funzione di ABCF2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ABCF2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal ABCF2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal ABCF2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ABCF2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal ABCF2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR ABCF2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ABCF2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ABCF2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.