Sox2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400050-LAC

O SOX2 humano codifica a Sox2, um fator de transcrição com domínio HMG-box que se liga ao DNA regulatório para controlar programas de expressão gênica que governam a pluripotência, a especificação de linhagens embrionárias e a manutenção de progenitores neurais. A Sox2 coopera com fatores centrais de células-tronco para modular a acessibilidade da cromatina e redes transcricionais que influenciam a autorrenovação, trajetórias de diferenciação e a estabilidade do destino celular. A expressão desregulada de SOX2 está associada a padrões de desenvolvimento aberrantes e tem sido amplamente estudada em contextos como estados semelhantes aos de células-tronco cancerígenas, plasticidade de linhagem e resistência a sinais de diferenciação. Como um nó central no controle transcricional e epigenético, o SOX2 é frequentemente investigado em vias ligadas à sinalização WNT, NOTCH e ao diálogo cruzado com fatores de crescimento, que moldam a “stemness” e o desenvolvimento neural.

As Partículas de Ativação Lentivirais Sox2 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de SOX2 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Sox2 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição SOX2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Sox2. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo SOX2 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.