Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) SCCA1: sc-403601-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SCCA1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SCCA1 Double Nickase (h) et le plasmide SCCA1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SERPINB3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SCCA1 Antibody (8H11): sc-21767
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SCCA1 | sc-403601-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SCCA1 | sc-403601-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SERPINB3 code l’antigène 1 du carcinome épidermoïde (SCCA1), une serpine de clade B qui agit principalement comme inhibiteur intracellulaire de protéases. SCCA1 module des processus dépendants des protéases liés à la différenciation épithéliale, aux réponses inflammatoires et à la gestion du stress cellulaire, notamment en protégeant contre l’activité des protéases lysosomales et cytosoliques. En modulant la protéostase et les signaux de survie cellulaire, SERPINB3 est fréquemment étudié dans des contextes de remodelage épithélial et de microenvironnements immunitaires dérégulés. Des altérations de l’expression de SCCA1 ont été associées à des pathologies de l’épithélium malpighien et à des phénotypes liés au cancer, ce qui étaye son utilisation comme marqueur mécanistique dans des modèles pertinents pour l’étude des maladies.
SCCA1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SERPINB3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SERPINB3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SERPINB3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SERPINB3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.