非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
肌球蛋白 Ib 抗体 (F-8): sc-393053. 未转染 293T: sc-117752 (A), 转染人肌球蛋白 Ib 的 293T: sc-116536 (B) 和 Jurkat (C) 全细胞裂解液中肌球蛋白 Ib 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
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Myosin Ib CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-403530
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Myosin Ib CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Myosin Ib基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Myosin Ib: sc-393053，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Myosin Ib CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-403530 | 20 µg | $397.00 |
概述
MYO1B 编码肌球蛋白 Ib（myosin Ib），这是一种依赖肌动蛋白、与膜相关的分子马达，有助于维持细胞皮质张力并推动质膜的动态重塑。肌球蛋白 Ib 通过与富含磷脂酰肌醇的膜偶联，将力的产生与膜结构连接起来，从而参与内吞运输、膜褶皱（membrane ruffling）以及肌动蛋白网络的组织。借由这些功能，它会影响细胞极性、黏附与迁移等过程，而这些过程与调控细胞骨架动态和囊泡运输的信号通路相互交织。在侵袭性细胞行为及上皮结构失调等背景下，MYO1B 表达或活性改变已受到研究关注，提示其与疾病相关的肌动蛋白皮质重塑机制研究具有相关性。
Myosin Ib CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中MYO1B基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对MYO1B基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏MYO1B开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Myosin Ib蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建MYO1B缺失的细胞模型，用于Myosin Ib信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Myosin Ib 功能至关重要的 MYO1B 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 MYO1B 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Myosin Ib CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Myosin Ib CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 MYO1B 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Myosin Ib HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Myosin Ib HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由MYO1B同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定MYO1B靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。