ERK 5 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400891-LAC

MAPK7 kodiert ERK5, eine atypische MAP-Kinase, die nachgeschaltet von MEK5 aktiviert wird und mitogene sowie Stresssignale integriert, um Transkription, Proliferation, Differenzierung und Zellüberleben zu regulieren. Die ERK5-Signalübertragung steht mit MAPK-Kaskaden in Wechselwirkung und moduliert die Aktivität von Transkriptionsfaktoren wie MEF2, wodurch Programme geprägt werden, die mit Zytoskelett-Umbau, Migration und angiogenen Antworten verknüpft sind. Eine dysregulierte Aktivität des MAPK7/ERK5-Signalwegs wurde in mehreren krankheitsrelevanten Kontexten mit veränderter Wachstumskontrolle und inflammatorischer Signalgebung in Verbindung gebracht, darunter onkogene Modelle und Modelle der Gefäßbiologie. Dadurch ist MAPK7 ein nützlicher Knotenpunkt, um Pathway-Crosstalk, stimulusabhängige Genexpression und adaptive Signaldynamiken in menschlichen Zellen zu untersuchen.

ERK 5 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente MAPK7-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ERK 5 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der MAPK7-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ERK 5-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen MAPK7-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.