Particules Lentivirales d'Activation (h) E-Selectin/CD62E/SELE: sc-400452-LAC

SELE code pour l’E-sélectine (CD62E), une molécule d’adhésion endothéliale inductible qui médie le roulement et le recrutement des leucocytes lors de l’inflammation en se liant à des ligands sialylés et fucosylés présents sur les neutrophiles et les monocytes. Sa transcription est rapidement augmentée par des cytokines pro-inflammatoires telles que le TNF-α et l’IL-1β via les voies de signalisation NF-κB et MAPK, reliant l’activation endothéliale au trafic leucocytaire et aux modifications de la perméabilité vasculaire. L’E-sélectine participe à la cascade d’adhésion plus large aux côtés d’ICAM-1 et de VCAM-1, modulant l’extravasation et les réponses inflammatoires spécifiques des tissus. Une expression dérégulée de SELE est associée à des affections inflammatoires chroniques et à des pathologies vasculaires, et elle est fréquemment étudiée dans des contextes tels que l’athérosclérose, les lésions d’ischémie-reperfusion, la dysfonction endothéliale associée au sepsis et l’angiogenèse associée aux tumeurs.

Les particules d'activation lentivirales E-Selectin/CD62E/SELE (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de SELE dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales E-Selectin/CD62E/SELE (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription SELE, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de E-Selectin/CD62E/SELE. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif SELE ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.