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CYP1A1双切口酶质粒(h) | sc-400511-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYP1A1双切口酶质粒(h2) | sc-400511-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP1A1(细胞色素 P450 1A1)是一种参与外源性物质代谢的单加氧酶,可催化多环芳烃及其他平面芳香化合物的氧化性生物转化。其表达受芳烃受体(AHR)信号轴强烈调控,从而将环境配体暴露与转录程序连接起来,这些转录程序会塑造细胞的氧化还原平衡与代谢应激反应。CYP1A1 的活性可生成反应性中间体并调节氧化应激,进而影响 DNA 损伤信号传导与炎症通路。CYP1A1 调控及诱导能力的改变,已在毒物易感性、致癌物代谢以及个体间化学敏感性差异等研究背景中被广泛探讨。
CYP1A1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CYP1A1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CYP1A1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CYP1A1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CYP1A1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。