Cdk4 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400148

개요

CDK4는 사이클린 의존성 키나아제 4(Cdk4)를 암호화하며, D형 사이클린과 짝을 이루어 RB 계열 단백질을 인산화하고 S기 진입에 필요한 E2F 의존적 전사를 촉진하는 G1기의 핵심 조절자입니다. Cdk4 활성은 유사분열 유도 신호와 CDKN2A/p16과 같은 CDK 억제인자에 의해 조절되며, MAPK/ERK 및 PI3K–AKT 경로로부터의 입력을 세포주기 진행(커밋먼트)에 통합합니다. CDK4–사이클린 D–RB 축의 조절 이상은 종양 및 발생생물학적 맥락 전반에서 비정상적 증식과 체크포인트 조절 변화와 흔히 연관됩니다. 세포주기의 결절점(nodal) 키나아제로서 CDK4는 증식, 노화(senescence), 계통(lineage) 지정, 스트레스 반응에서의 역할을 규명하기 위해 일상적으로 연구됩니다.

Cdk4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CDK4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CDK4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CDK4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Cdk4 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Cdk4 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CDK4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Cdk4 기능에 중요한 CDK4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CDK4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Cdk4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Cdk4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CDK4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Cdk4 HDR 플라스미드 (h) 및 Cdk4 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CDK4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CDK4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.