Peroxin 10 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406226

개요

PEX10은 퍼옥신 10(peroxin 10)을 암호화하며, 이는 퍼옥시좀 막에 박혀 있는 RING finger E3 유비퀴틴 리가아제로서 퍼옥시좀 생합성과 기질(matrix) 단백질 수입에 필수적입니다. PEX10은 PEX2 및 PEX12와 함께 퍼옥시좀 유비퀴틴화 기계의 일부로 작용하면서 PEX5 수입 수용체의 재활용을 조절하고, 초장쇄 지방산(very-long-chain fatty acid) β-산화와 활성산소종(ROS) 항상성 등 퍼옥시좀 대사 경로를 지원합니다. PEX10 기능이 손상되면 퍼옥시좀 조립이 저해되고 지질 대사 및 산화환원 균형이 무너져, 세포 스트레스 반응과 세포소기관 간 상호작용에 핵심적인 과정들이 영향을 받습니다. PEX10의 병원성 변이는 젤베거 스펙트럼(Zellweger spectrum) 내 퍼옥시좀 생합성 장애와 연관되어 있어, 세포소기관 기능장애 기전 연구에서 중요한 표적이 됩니다.

Peroxin 10 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PEX10 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PEX10 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PEX10의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Peroxin 10 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Peroxin 10 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PEX10 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Peroxin 10 기능에 중요한 PEX10 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PEX10 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Peroxin 10 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Peroxin 10 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PEX10 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Peroxin 10 HDR 플라스미드 (h) 및 Peroxin 10 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PEX10 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PEX10 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.