BBS10 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408538-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BBS10O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BBS10 (h) e o Plasmídeo Double Nickase BBS10 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BBS10. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BBS10 Anticorpo (A-3): sc-518239
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BBS10 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408538-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BBS10 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-408538-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BBS10 codifica uma proteína do tipo chaperonina que atua no complexo BBSome/chaperonina para dar suporte à ciliogênese e à montagem/tráfego de proteínas de membrana ciliar. Por meio do seu papel na formação do cílio primário e em processos relacionados ao transporte intraflagelar, o BBS10 influencia redes de sinalização dependentes de cílios, incluindo Hedgehog e outras vias sensoriais que coordenam a polaridade celular, a proliferação e a diferenciação. A disrupção de BBS10 compromete a estrutura ciliar e o tráfego de receptores, associando-o a fenótipos pleiotrópicos característicos das ciliopatias. Assim, o BBS10 humano é amplamente estudado em modelos da síndrome de Bardet–Biedl e de outros distúrbios relacionados aos cílios para investigar mecanismos de desenvolvimento de órgãos, metabolismo e função sensorial.
BBS10 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BBS10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BBS10. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BBS10. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BBS10 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.