Mi2-b Ativadores

Os activadores Mi2-b comuns incluem, entre outros, a forskolina CAS 66575-29-9, o galato de (-)-epigalocatequina CAS 989-51-5, o cloridrato de isoproterenol CAS 51-30-9, o PMA CAS 16561-29-8 e o LY 294002 CAS 154447-36-6.

O Mi-2 beta (Mi2-β), também conhecido como CHD4, faz parte do complexo de remodelação do nucleossoma e desacetilase (NuRD), que desempenha um papel na remodelação da cromatina e na regulação da transcrição. Uma classe de compostos denominada activadores Mi2-β incluiria moléculas capazes de aumentar a atividade deste remodelador da cromatina. A descoberta de activadores para Mi2-β exigiria normalmente o desenvolvimento de um ensaio que pudesse medir com precisão a atividade de remodelação da cromatina do complexo NuRD. Esse ensaio poderia envolver a utilização de nucleossomas ou substratos de cromatina marcados com marcadores fluorescentes, que mudariam de intensidade de fluorescência ou de ressonância após a remodelação pelo complexo NuRD. As plataformas de triagem de alto rendimento (HTS) poderiam então ser utilizadas para testar uma biblioteca diversificada de pequenas moléculas quanto à sua capacidade de aumentar a taxa ou a extensão da remodelação da cromatina por Mi2-β.

Após a identificação de potenciais activadores de Mi2-β através de HTS, os passos seguintes envolveriam a confirmação e a caraterização da atividade destes compostos. Seriam utilizados ensaios secundários para excluir efeitos inespecíficos e para garantir que o aumento observado na atividade de remodelação se deve diretamente à ação dos compostos sobre Mi2-β. Nesta fase, técnicas como a calorimetria de titulação isotérmica (ITC) e a ressonância plasmónica de superfície (SPR) seriam de grande utilidade, uma vez que podem fornecer informações pormenorizadas sobre as interacções de ligação entre os activadores e a Mi2-β, incluindo informações sobre a afinidade de ligação, a cinética e a termodinâmica. Estes métodos biofísicos podem confirmar a interação direta dos activadores com Mi2-β e podem também revelar se a ativação é competitiva ou não competitiva em relação ao substrato do nucleossoma.