2610044O15Rik Ativadores

Os activadores comuns do 2610044O15Rik incluem, entre outros, a forskolina CAS 66575-29-9, o monofosfato de 8-bromoadenosina 3',5'-cíclico CAS 76939-46-3, o rolipram CAS 61413-54-5, o IBMX CAS 28822-58-4 e o monofosfato de adenosina 3',5'-cíclico CAS 60-92-4.

Os compostos químicos identificados como activadores 2610044O15Rik são uma classe distinta que pode aumentar a expressão do gene 2610044O15Rik num ambiente celular. O processo de descoberta destes activadores envolve tipicamente um protocolo de triagem de alto rendimento (HTS), que é um método eficiente para peneirar grandes bibliotecas de substâncias químicas para encontrar aquelas com atividade biológica específica. A pedra angular desta técnica de rastreio é um ensaio de gene repórter que é sensível à ativação do promotor do gene 2610044O15Rik. Este sistema de ensaio integra um gene repórter, que pode codificar um marcador fluorescente ou quimioluminescente, sob a sequência reguladora do gene 2610044O15Rik. A ativação do promotor por um composto químico resulta na expressão do repórter, e este evento é marcado por um sinal mensurável. Assim que os potenciais activadores do 2610044O15Rik são identificados através de HTS, são submetidos a uma validação rigorosa para confirmar as suas capacidades de ativação do gene. Um método fundamental utilizado neste processo de validação é a reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR), que quantifica a expressão do ARNm do gene 2610044O15Rik após a aplicação do composto. Um elevado nível de ARNm, quando comparado com controlos não tratados, indicaria que o composto pode efetivamente estimular a expressão do gene a nível transcricional. Para determinar se este suprarregulado ao nível do ARNm se traduz num aumento da proteína codificada pelo gene, é utilizada a análise Western blot. Este procedimento envolve a separação de proteínas por eletroforese em gel, a sua subsequente transferência para uma membrana e a deteção utilizando anticorpos específicos contra a proteína alvo do 2610044O15Rik. Um composto que mostre consistentemente a capacidade de elevar os níveis de mRNA e de proteína quando comparado com os controlos é confirmado como um ativador.