ZNF575 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-430383

Panoramica

Il gene murino **Zfp575** codifica la proteina a dita di zinco **ZNF575**, un presunto regolatore trascrizionale legante il DNA appartenente alla famiglia delle dita di zinco di tipo C2H2, spesso associata al controllo sequenza-specifico dell’espressione genica. Sebbene l’annotazione funzionale resti limitata, le proteine di questa classe modulano comunemente programmi trascrizionali associati alla cromatina che influenzano lo stato cellulare, la differenziazione e le risposte a segnali di sviluppo o ambientali. ZNF575 è pertanto rilevante per lo studio delle reti di regolazione genica e dei meccanismi epigenetici che modellano la trascrizione специфica di tessuto. La deregolazione del controllo trascrizionale mediato da dita di zinco è ampiamente associata ad alterazioni della proliferazione, della stabilità genomica e a firme di espressione legate a patologie, a supporto di studi esplorativi di **Zfp575** in questi contesti.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ZNF575 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Zfp575 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Zfp575 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Zfp575 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ZNF575.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Zfp575 per lo studio della segnalazione di ZNF575, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Zfp575 critici per la funzione di ZNF575
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Zfp575 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal ZNF575 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal ZNF575 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Zfp575. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal ZNF575 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR ZNF575 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Zfp575 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Zfp575 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.