ZIP10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406811

Descripción general

SLC39A10 codifica ZIP10, un transportador de entrada de zinc (Zn2+) en la membrana plasmática de la familia SLC39/ZIP que regula la disponibilidad citosólica de Zn2+ para la actividad de metaloenzimas, factores de transcripción con dedos de zinc y la señalización sensible al estado redox. Al controlar la homeostasis del zinc, ZIP10 influye en vías relacionadas con la proliferación celular, la diferenciación y las respuestas al estrés, incluidas cascadas de señalización moduladas por zinc mediante la regulación dependiente de zinc de las actividades de quinasas y fosfatasas. La expresión alterada de ZIP10 o el manejo del zinc se ha asociado en la literatura con la función de células inmunitarias, la biología epitelial y fenotipos relacionados con tumores, lo que refleja la amplia dependencia de los programas celulares de la disponibilidad de zinc. Estas características convierten a SLC39A10 en una diana relevante para estudios mecanísticos de redes de señalización reguladas por zinc y de la biología del transporte de iones metálicos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZIP10 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SLC39A10 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SLC39A10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SLC39A10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZIP10.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SLC39A10 para la investigación de la señalización de ZIP10, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SLC39A10 críticos para la función de ZIP10
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SLC39A10 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ZIP10 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ZIP10 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SLC39A10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZIP10 (h) y el plásmido HDR ZIP10 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SLC39A10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SLC39A10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.