Zic2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404720

Descripción general

ZIC2 codifica el factor de transcripción con dedos de zinc Zic2, un regulador clave del patrón embrionario y del desarrollo neural que modula programas de expresión génica que controlan la especificación del destino celular, la proliferación y la diferenciación. Zic2 actúa dentro de redes transcripcionales del desarrollo e interactúa con vías de señalización que determinan la morfogénesis, incluidas las que influyen en la formación del tubo neural y el patrón de la línea media del prosencéfalo. La alteración de la actividad de ZIC2 se asocia con trastornos congénitos del neurodesarrollo, en particular la holoprosencefalia, y se ha informado de una expresión desregulada en estudios de biología tumoral y plasticidad de linaje. Como regulador transcripcional que se une al ADN, Zic2 ofrece un punto de entrada mecanístico para investigar el control potenciador–promotor, la transcripción dependiente de la cromatina y los circuitos reguladores génicos del desarrollo en células humanas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Zic2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ZIC2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ZIC2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ZIC2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Zic2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ZIC2 para la investigación de la señalización de Zic2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ZIC2 críticos para la función de Zic2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ZIC2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Zic2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Zic2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ZIC2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Zic2 (h) y el plásmido HDR Zic2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ZIC2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ZIC2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.