ZHX2 Lentiviral Activation Particles (m): sc-436490-LAC

Das Mausgen *Zhx2* kodiert das Protein ZHX2 (Zinc Fingers and Homeoboxes 2), einen nukleären Transkriptionsfaktor, der Homo- und Heterodimere mit anderen Mitgliedern der ZHX-Familie bildet, um Genexpressionsprogramme zu modulieren, die mit Differenzierung und gewebespezifischer Homöostase verknüpft sind. ZHX2 wird mit der Regulation hepatischer metabolischer Netzwerke, der Lipid- und Glukoseverarbeitung sowie einer umfassenderen Kontrolle proliferationsbezogener transkriptioneller Zustände durch Bindung an Promotoren und Enhancer in Verbindung gebracht. Eine veränderte ZHX2-Aktivität wurde in Zusammenhängen der Leberbiologie und tumorrelevanter transkriptioneller Reprogrammierung beschrieben, was seine Eignung als mechanistischer Knotenpunkt zur Untersuchung des Crosstalks zwischen Metabolismus und Proliferation stützt. Als transkriptioneller Regulator wird ZHX2 in Mausmodellsystemen häufig dahingehend untersucht, wie er Zellschicksalsentscheidungen und stressresponsive Genexpression prägt.

ZHX2 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Zhx2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ZHX2 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Zhx2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ZHX2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Zhx2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.