Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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VAX2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407255
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- VAX2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico VAX2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: VAX2 Anticuerpo (VAX2A8F12): sc-81422
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
VAX2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407255 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
VAX2 (homeobox 2 ventral anterior) codifica un factor de transcripción tipo homeobox que regula programas de expresión génica necesarios para el patrón embrionario de la retina ventral y el tallo óptico. Funciona dentro de redes transcripcionales del desarrollo que se cruzan con la señalización de morfógenos, incluidos los gradientes de Sonic hedgehog (SHH) y del ácido retinoico, para establecer la identidad dorsoventral y las decisiones de destino del neuroepitelio. Al controlar una transcripción restringida espacialmente en el ojo en desarrollo, VAX2 ayuda a coordinar la diferenciación de las células retinianas, la guía axonal y la formación del nervio óptico. La expresión desregulada de VAX2 o la alteración de su circuito regulador se ha asociado con malformaciones oculares congénitas y fenotipos del neurodesarrollo, lo que lo convierte en un nodo útil para estudiar el desarrollo del ojo humano y vías de diferenciación relevantes para enfermedades.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO VAX2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen VAX2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del VAX2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de VAX2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína VAX2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en VAX2 para la investigación de la señalización de VAX2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de VAX2 críticos para la función de VAX2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de VAX2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido VAX2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido VAX2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus VAX2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR VAX2 (h) y el plásmido HDR VAX2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología VAX2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana VAX2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.