USF-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401713

Descripción general

USF2 codifica el factor estimulador upstream 2 (USF-2), un factor de transcripción ubicuo del tipo bHLH con cremallera de leucina que se une a motivos E-box y modula la expresión génica basal y en respuesta a estímulos. USF-2 participa en el control transcripcional de la homeostasis metabólica, la progresión del ciclo celular, la diferenciación y las respuestas al estrés mediante la regulación coordinada de la arquitectura de los promotores y del contexto de la cromatina. Su actividad se entrecruza con vías que gobiernan el metabolismo de la glucosa y los lípidos, la señalización inflamatoria y el estrés oxidativo, y puede influir en programas transcripcionales vinculados a la biología tumoral. La alteración de la expresión o la función de USF2 se ha asociado con proliferación desregulada y fenotipos metabólicos, lo que lo convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos sobre la remodelación de redes transcripcionales.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO USF-2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen USF2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del USF2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de USF2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína USF-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en USF2 para la investigación de la señalización de USF-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de USF2 críticos para la función de USF-2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de USF2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido USF-2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido USF-2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus USF2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR USF-2 (h) y el plásmido HDR USF-2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología USF2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana USF2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.