USF-1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401345-LAC

USF1 kodiert den upstream stimulatory factor 1 (USF-1), einen ubiquitär exprimierten bHLH-Leucin-Zipper-Transkriptionsfaktor, der an E-Box-Motive bindet und die basale sowie signalabhängige Genexpression koordiniert. USF-1 integriert metabolische und stressantwortende Programme und beeinflusst über die Regulation transkriptioneller Netzwerke den Lipid- und Glukosestoffwechsel, die mitochondriale Funktion sowie oxidative und inflammatorische Signalwege. Eine veränderte USF1-Aktivität wurde mit Dyslipidämie und kardiometabolischen Merkmalen in Verbindung gebracht und wird zudem im Kontext zellulärer Transformation und transkriptioneller Fehlregulation untersucht. Als zentraler Regulator der Promotoraktivität wird USF-1 häufig genutzt, um genregulatorische Schaltkreise, Enhancer–Promotor-Kommunikation und stimulusabhängige Transkriptionskontrolle in humanen Zellen zu untersuchen.

USF-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente USF1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

USF-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der USF1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen USF-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen USF1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.