Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) UFD1: sc-403304-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)UFD1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa UFD1 (h) y el plásmido de doble nickasa UFD1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a UFD1L. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: UFD1 Anticuerpo (B-7): sc-377265
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) UFD1 | sc-403304-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) UFD1 | sc-403304-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UFD1L codifica UFD1, un componente central del complejo UFD1–NPL4 que coopera con la ATPasa AAA+ p97/VCP para extraer sustratos poliubiquitinados de membranas y de ensamblajes macromoleculares con destino a su degradación por el proteasoma. Este eje es fundamental para la degradación asociada al retículo endoplásmico (ERAD), el control de calidad proteica y el recambio dependiente de ubiquitina durante la progresión del ciclo celular y las respuestas al daño del ADN. Al regular la eliminación de complejos proteicos mal plegados o detenidos, UFD1 contribuye a la proteostasis y a las vías de adaptación al estrés que influyen en la viabilidad de células con rápida proliferación. La regulación alterada de la vía p97/VCP–UFD1/NPL4 se ha relacionado con desequilibrios de la proteostasis y defectos en el mantenimiento del genoma, relevantes para estudios de neurodegeneración y fenotipos celulares asociados al cáncer.
UFD1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus UFD1L en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de UFD1L. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de UFD1L. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con UFD1L alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.