TSG-6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423437

Descripción general

Tnfaip6 codifica la proteína 6 inducida por el factor de necrosis tumoral alfa (TSG‑6), una proteína secretada que se une al hialuronano y remodela la matriz extracelular durante la inflamación y la lesión tisular. TSG‑6 cataliza la transferencia de cadenas pesadas del inter‑α‑inhibidor al hialuronano, lo que favorece la formación de matrices estables ricas en HA que influyen en la adhesión de leucocitos, la migración celular y la resolución de las respuestas inflamatorias. En sistemas murinos, TNFAIP6 se induce rápidamente aguas abajo de señales proinflamatorias como TNF/NF‑κB y modula la actividad de quimiocinas, las redes de proteasas y la organización de la matriz. La biología desregulada de TSG‑6/HA se ha vinculado a modelos de artritis, inflamación pulmonar e intestinal, reparación de heridas y fibrosis, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico que conecta la señalización de citocinas con la dinámica de la MEC.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TSG-6 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tnfaip6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tnfaip6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tnfaip6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TSG-6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tnfaip6 para la investigación de la señalización de TSG-6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Tnfaip6 críticos para la función de TSG-6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tnfaip6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TSG-6 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TSG-6 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tnfaip6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TSG-6 (m) y el plásmido HDR TSG-6 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tnfaip6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tnfaip6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.