TRPM5 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403223

개요

TRPM5(일과성 수용체 전위 양이온 채널 M 아과(family) 구성원 5)는 Ca2+에 의해 활성화되는 단가 양이온 채널로, 세포내 칼슘 신호에 반응해 원형질막을 탈분극시킵니다. 이 채널은 포스포리파아제 C(PLC) 신호전달과 IP3 매개 Ca2+ 방출의 하위 단계에서 작동하며, 화학감각 및 분비 세포 유형에서 자극 유발 전기적 활동과 신호 증폭을 형성합니다. TRPM5 활성은 미각 전달을 비롯한 기타 칼슘 의존적 세포 반응에 관여하는 GPCR 구동 경로와 연관되어, 흥분성과 하위 전사 프로그램에 영향을 미칩니다. TRPM5의 발현 또는 기능 조절 이상은 감각 신호전달의 변화와 관련이 있는 것으로 보고되었고, 암세포 행동 및 대사 신호전달 표현형의 맥락에서도 연구되어 왔습니다.

TRPM5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TRPM5 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TRPM5 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TRPM5의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TRPM5 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TRPM5 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TRPM5 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TRPM5 기능에 중요한 TRPM5 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TRPM5 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TRPM5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 TRPM5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TRPM5 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TRPM5 HDR 플라스미드 (h) 및 TRPM5 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TRPM5 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TRPM5 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.