Titin Lentiviral Activation Particles (h): sc-402827-LAC

Das humane Gen **TTN** kodiert für Titin, ein riesiges sarkomerisches Gerüstprotein, das sich von der Z-Scheibe bis zur M-Linie erstreckt und mechanische Elastizität mit der Architektur der Myofibrillen verbindet. Titin organisiert die Positionierung der dicken Filamente, trägt über dehnbare I-Band-Domänen zur passiven Spannung bei und koordiniert mechanosensitive Signalwege an Z-Scheibe und M-Bande durch Interaktionen mit Proteinen wie Telethonin, Obscurin und muskelspezifischen Kinase-Hubs. Über seine Funktionen bei der Sarkomerassemblierung, der Kraftübertragung und der Proteinhomöostase beeinflusst **TTN** Signalwege wie die Mechanotransduktion, den Ubiquitin-Proteasom-abhängigen Proteinabbau sowie stressadaptive Umbauprozesse in quergestreifter Muskulatur. Genetische und funktionelle Störungen von **TTN** sind stark mit Kardiomyopathien und Skelettmyopathien assoziiert, weshalb die Regulation von Titin ein zentrales Thema der Muskelbiologie und der Krankheitsmodellierung ist.

Titin Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente TTN-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Titin Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der TTN-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Titin-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen TTN-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.