Tctex2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423317

Descripción general

Tcte3 codifica Tctex2, una proteína asociada a la cadena ligera de dineína implicada en procesos de transporte dependientes de microtúbulos que sostienen la polarización y la motilidad celular. En el ratón, Tctex2 se asocia principalmente con la función de cilios y flagelos, donde el movimiento impulsado por la dineína y el tráfico de cargas son esenciales para la dinámica del axonema y la motilidad espermática. La alteración de componentes accesorios de la dineína puede afectar la ciliogénesis, el transporte intraflagelar y la organización relacionada con el centrosoma, generando efectos medibles sobre la señalización celular y los patrones del desarrollo. En consecuencia, Tcte3/Tctex2 es relevante para investigaciones sobre fenotipos asociados a cilios, modelos de infertilidad masculina y mecanismos que conectan el transporte del citoesqueleto con la homeostasis tisular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Tctex2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tcte3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tcte3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tcte3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Tctex2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tcte3 para la investigación de la señalización de Tctex2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Tcte3 críticos para la función de Tctex2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tcte3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Tctex2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Tctex2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tcte3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Tctex2 (m) y el plásmido HDR Tctex2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tcte3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tcte3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.