TBX6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405632

Descripción general

TBX6 codifica un factor de transcripción de la familia T-box que regula la especificación del mesodermo y el patrón del mesodermo paraxial durante el desarrollo humano temprano, coordinando programas génicos que impulsan la formación de somitas y la segmentación vertebral. Funciona dentro de redes transcripcionales que integran señales del desarrollo, incluidas las vías de Notch y WNT/β-catenina, para controlar el compromiso de linaje y la organización axial. Las alteraciones en la dosis o la función de TBX6 se han relacionado con malformaciones congénitas de la columna y las costillas, lo que lo convierte en un nodo útil para estudiar la arquitectura genética del desarrollo vertebral. En modelos celulares, la perturbación de TBX6 se utiliza habitualmente para investigar trayectorias de diferenciación, la lógica de los potenciadores (enhancers) y las decisiones de destino celular impulsadas por factores de transcripción.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TBX6 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TBX6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TBX6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TBX6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TBX6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TBX6 para la investigación de la señalización de TBX6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TBX6 críticos para la función de TBX6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TBX6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TBX6 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TBX6 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TBX6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TBX6 (h) y el plásmido HDR TBX6 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TBX6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TBX6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.