TAL1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h2): sc-401101-KO-2

Panoramica

TAL1 (proteina 1 della leucemia linfoblastica acuta a cellule T) è un fattore di trascrizione di tipo basic helix–loop–helix che regola la specificazione di linea e i programmi di differenziamento nello sviluppo ematopoietico, in particolare nei compartimenti eritroide e delle cellule T. Funziona all’interno di complessi trascrizionali multiproteici con partner quali E2A/TCF3, LMO2, LDB1 e fattori GATA per controllare l’attività degli enhancer e l’accessibilità della cromatina nei geni che governano proliferazione e maturazione. TAL1 integra reti di segnalazione e di trascrizione che determinano le decisioni di destino delle cellule staminali/progenitrici ematopoietiche e mantiene stati trascrizionali dipendenti dal contesto. Un’espressione deregolata di TAL1 o il dirottamento degli enhancer è fortemente associato alla biologia della leucemia linfoblastica acuta a cellule T e, più in generale, ad alterazioni dei circuiti trascrizionali ematopoietici.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TAL1 (h2) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene TAL1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del TAL1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto TAL1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TAL1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di TAL1 per lo studio della segnalazione di TAL1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni TAL1 critici per la funzione di TAL1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di TAL1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal TAL1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal TAL1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus TAL1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal TAL1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR TAL1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia TAL1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio TAL1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.