TAL1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2): sc-401101-KO-2

Übersicht

TAL1 (T‑Zell‑akutes lymphatisches Leukämieprotein 1) ist ein basischer Helix‑Loop‑Helix‑Transkriptionsfaktor, der die Linienfestlegung und Differenzierungsprogramme während der hämatopoetischen Entwicklung reguliert, insbesondere in den erythroiden und T‑Zell‑Kompartimenten. Er wirkt in Multiprotein‑Transkriptionskomplexen mit Partnern wie E2A/TCF3, LMO2, LDB1 und GATA‑Faktoren, um die Enhancer‑Aktivität und die Chromatinzugänglichkeit an Genen zu steuern, die Proliferation und Reifung kontrollieren. TAL1 integriert Signal‑ und Transkriptionsnetzwerke, die Schicksalsentscheidungen hämatopoetischer Stamm‑/Vorläuferzellen prägen, und erhält kontextabhängige transkriptionelle Zustände aufrecht. Eine fehlregulierte TAL1‑Expression oder „Enhancer Hijacking“ ist stark mit der Biologie der T‑zell‑akuten lymphoblastischen Leukämie sowie mit umfassenderen Störungen der hämatopoetischen transkriptionellen Schaltkreise assoziiert.

Das TAL1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TAL1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TAL1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TAL1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TAL1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TAL1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TAL1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TAL1-Exone abzielen, die für die TAL1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TAL1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TAL1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TAL1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TAL1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TAL1 HDR-Plasmid (h) und TAL1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TAL1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TAL1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.