Synaptogyrin-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423240

Visão geral

Syngr3 codifica a sinaptogirina-3, uma proteína de membrana de vesículas sinápticas tetraspânica, enriquecida em terminais pré-sinápticos, que contribui para o tráfego de vesículas e para a dinâmica da liberação de neurotransmissores. A sinaptogirina-3 participa de processos de exocitose regulada e de reciclagem endocítica que moldam a transmissão e a plasticidade sinápticas, interagindo com a maquinaria central do ciclo das vesículas sinápticas. Alterações na função da família das sinaptogirinas têm sido associadas a perturbações na atividade de redes neuronais e na homeostase sináptica, tornando Syngr3 relevante para estudos de mecanismos neurodesenvolvimentais e neurodegenerativos. Em modelos murinos, a perturbação de Syngr3 é útil para dissecar contribuições pré-sinápticas para fenótipos ao nível de circuitos e para a sinalização dependente de atividade.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Synaptogyrin-3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Syngr3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Syngr3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Syngr3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Synaptogyrin-3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Syngr3 para a investigação da sinalização de Synaptogyrin-3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Syngr3 críticos para a função Synaptogyrin-3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Syngr3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Synaptogyrin-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Synaptogyrin-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Syngr3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Synaptogyrin-3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Synaptogyrin-3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Syngr3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Syngr3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.