Svs5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423227

Descripción general

Svs5 codifica la proteína secretoria 5 de las vesículas seminales (Svs5), una proteína del tracto reproductor del ratón asociada a las secreciones de las glándulas accesorias masculinas y al entorno pos-eyaculatorio. Las proteínas de la familia Svs están implicadas en procesos como la coagulación del semen, la protección de los espermatozoides y la modulación de la función espermática mediante interacciones con redes de proteínas extracelulares y el remodelado proteolítico. Aunque Svs5 está menos caracterizada que otras proteínas relacionadas de las vesículas seminales, su perfil de expresión la hace relevante para estudios sobre programas génicos regulados por andrógenos, fisiología reproductiva y factores que influyen en fenotipos de fertilidad masculina. La regulación alterada de proteínas secretorias de glándulas accesorias puede aportar información sobre los mecanismos subyacentes a la subfertilidad y la biología del tracto reproductor en modelos murinos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Svs5 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Svs5 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Svs5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Svs5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Svs5.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Svs5 para la investigación de la señalización de Svs5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Svs5 críticos para la función de Svs5
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Svs5 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Svs5 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Svs5 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Svs5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Svs5 (m) y el plásmido HDR Svs5 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Svs5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Svs5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.