SURF-6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423223

Descripción general

Surf6 codifica SURF-6, una proteína nucleolar conservada implicada en la biogénesis de los ribosomas y en la homeostasis del nucléolo mediante su participación en el procesamiento del pre-rRNA y la maduración de las subunidades ribosomales. SURF-6 interviene en procesos de unión a ARN y de organización nucleolar que coordinan la capacidad de síntesis proteica con los programas de crecimiento y proliferación celular. La alteración de la función nucleolar y de la producción de ribosomas está estrechamente ligada a respuestas de estrés celular, cambios en la traducción y defectos de proliferación, lo que hace a Surf6 relevante para estudios de estabilidad genómica y control del crecimiento en sistemas de mamíferos. En modelos murinos, la perturbación de Surf6 ofrece un punto de entrada manejable para investigar cómo la biogénesis ribosomal se relaciona con fenotipos del desarrollo y con la desregulación de vías nucleolares asociada a enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SURF-6 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Surf6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Surf6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Surf6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SURF-6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Surf6 para la investigación de la señalización de SURF-6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Surf6 críticos para la función de SURF-6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Surf6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SURF-6 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SURF-6 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Surf6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SURF-6 (m) y el plásmido HDR SURF-6 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Surf6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Surf6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.