Plasmide Double Nickase (h) Sulfiredoxin: sc-403023-NIC

SRXN1 code la sulfiredoxine, une réductase ATP‑dépendante qui restaure les peroxyrédoxines 2‑Cys sur-oxydées à partir de l’état d’acide sulfinique, réactivant ainsi la détoxification des peroxydes médiée par les peroxyrédoxines. Grâce à ce cycle de réparation, la sulfiredoxine contribue au maintien de l’homéostasie redox cellulaire et soutient des processus de signalisation influencés par les espèces réactives de l’oxygène, notamment des programmes d’adaptation au stress en interaction avec les voies antioxydantes régulées par NRF2. Une expression altérée de SRXN1 a été associée à des phénotypes de stress oxydatif et rapportée dans des contextes tels que la biologie tumorale, l’inflammation et la neurodégénérescence, où la fonction des peroxyrédoxines et la capacité tampon redox peuvent orienter les décisions de destinée cellulaire. En conséquence, SRXN1 est largement étudié pour son rôle dans la régulation du métabolisme des peroxydes, l’oxydation des protéines et les réseaux de signalisation sensibles au statut redox.

Sulfiredoxin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SRXN1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SRXN1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SRXN1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SRXN1.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.