Stat2 Plasmide Double Nickase (h): sc-417454-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Stat2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Stat2 Double Nickase Plasmid (h) e il Stat2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira STAT2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Stat2 Antibody (B-3): sc-514193
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Stat2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-417454-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Stat2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-417454-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
STAT2 codifica Stat2, un fattore di trascrizione centrale nella segnalazione degli interferoni di tipo I e di tipo III, che forma il complesso ISGF3 con STAT1 e IRF9 per indurre l’espressione dei geni stimolati dall’interferone. In seguito all’attivazione di IFNAR, JAK1 e TYK2 fosforilano Stat2, consentendone la traslocazione nel nucleo e la regolazione della difesa antivirale, della presentazione dell’antigene e del crosstalk dell’immunità innata. L’attività di Stat2 influenza le reti citochiniche e le vie di restrizione cellulo-intrinseche, plasmando le risposte all’infezione virale e agli stimoli infiammatori. Una segnalazione di STAT2 deregolata è stata associata a errori congeniti dell’immunità e a una suscettibilità alterata a fenotipi di malattie infettive e immuno-mediate, rendendolo un bersaglio frequente nella ricerca di immunologia meccanicistica.
Stat2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus STAT2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di STAT2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di STAT2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con STAT2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.