SPLUNC2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406336

Visão geral

BPIFA2 codifica a SPLUNC2, um membro secretado da família de proteínas com dobra do tipo BPI, expresso nos epitélios das vias aéreas superiores e das glândulas salivares. A SPLUNC2 contribui para a defesa inata das mucosas ao interagir com componentes microbianos e ao influenciar a homeostase do líquido de superfície das vias aéreas, conectando a função de barreira epitelial a programas de sinalização inflamatória. Por atuar nas interações hospedeiro–microrganismo e na modulação das respostas imunes locais, o BPIFA2 é frequentemente investigado em estudos sobre inflamação do trato respiratório, suscetibilidade a infecções e remodelamento epitelial. Alterações na expressão de BPIFA2/SPLUNC2 têm sido associadas a fenótipos de doenças das vias aéreas e são usadas como um indicador molecular em modelos de condições inflamatórias sinonasais e pulmonares.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SPLUNC2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BPIFA2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BPIFA2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BPIFA2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SPLUNC2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BPIFA2 para a investigação da sinalização de SPLUNC2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BPIFA2 críticos para a função SPLUNC2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BPIFA2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SPLUNC2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SPLUNC2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BPIFA2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SPLUNC2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SPLUNC2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BPIFA2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BPIFA2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.