spectrin α I CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403563

개요

SPTA1은 인간 스펙트린 α I을 암호화하며, 이는 적혈구 막 골격의 핵심 구성요소로서 β-스펙트린과 헤테로다이머를 형성해 막의 안정성과 변형능을 지지하는 격자 구조를 조립합니다. 이 세포골격 네트워크는 막 관통 단백질을 액틴 기반의 접합 복합체와 연결하여, 혈류 순환 중 반복적으로 가해지는 전단 스트레스 환경에서 기계적 탄성을 조율합니다. 스펙트린 구조가 교란되면 적혈구 형태 유지와 막 무결성이 손상되어, 막 수송, 세포골격 재구성, 이온 항상성 등의 과정에 영향을 미칩니다. SPTA1의 유전적 변이 또는 결핍은 유전성 구형적혈구증과 타원적혈구증을 포함한 유전성 적혈구 막 질환과 연관되어 있어, 적혈구 생물학에서 유전자형–표현형 관계를 연구하는 데 중요한 표적입니다.

spectrin α I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SPTA1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SPTA1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SPTA1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 spectrin α I 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 spectrin α I 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SPTA1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• spectrin α I 기능에 중요한 SPTA1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SPTA1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• spectrin α I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 spectrin α I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SPTA1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  spectrin α I HDR 플라스미드 (h) 및 spectrin α I HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SPTA1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SPTA1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.