Sp110 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405542

概要

SP110はSp110という核内ボディ関連タンパク質をコードしており、転写制御やクロマチン依存的な免疫プログラムの制御に関与するとされています。Sp110は核内構造の維持に関わり、インターフェロン応答性遺伝子や炎症関連遺伝子の発現を形作る制御複合体と相互作用することで、宿主防御経路やマクロファージ関連機能との関連が示されています。遺伝学的研究および発現解析により、SP110は免疫介在性表現型の感受性やそのばらつきと関連付けられており、自然免疫シグナル伝達ネットワークを解明するための分子レベルの入口として有用であることが支持されています。SP110活性の変化は、核内ボディ構成要素が細胞状態、転写出力、ならびに病原体応答遺伝子回路にどのように影響するかを研究する際にも利用されています。

Sp110 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSP110遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SP110内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SP110のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Sp110タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Sp110シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SP110欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Sp110の機能に不可欠なSP110エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SP110ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Sp110 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSp110 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SP110遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Sp110 HDRプラスミド（h）および Sp110 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSP110ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSP110標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。