Plasmide Double Nickase (h) SH2D1A: sc-404747-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SH2D1A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SH2D1A Double Nickase (h) et le plasmide SH2D1A Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SH2D1A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SH2D1A Antibody (A-8): sc-398118
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SH2D1A | sc-404747-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SH2D1A | sc-404747-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SH2D1A code une protéine adaptatrice contenant un domaine SH2 (SAP) qui couple les récepteurs de la famille SLAM à la signalisation en aval dans les lymphocytes T et les cellules NK, façonnant la fonction cytotoxique, la production de cytokines et la coopération entre lymphocytes. En modulant les interactions avec des kinases et des phosphatases inhibitrices, SH2D1A influence la formation de la synapse immunologique et les seuils de signalisation qui gouvernent les réponses immunitaires antivirales et humorales. Une altération de SH2D1A perturbe les voies médiées par SLAM qui contrôlent l’activité des lymphocytes cytotoxiques et l’aide aux cellules B, entraînant une dérégulation immunitaire. Des variants avec perte de fonction sont associés à la maladie lymphoproliférative liée à l’X de type 1, avec une susceptibilité à une immunopathologie sévère associée à l’EBV et des défauts plus larges de l’homéostasie immunitaire.
SH2D1A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SH2D1A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SH2D1A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SH2D1A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SH2D1A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.