SGEF Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-409874-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SGEFO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SGEF (h) e o Plasmídeo Double Nickase SGEF (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ARHGEF26. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SGEF Anticorpo (E-5): sc-514048
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SGEF Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-409874-NIC | 20 µg | $410.00 |
ARHGEF26 codifica a SGEF, um fator de troca de nucleotídeos de guanina (GEF) para Rho da família Dbl, que ativa GTPases Rho, com papéis de destaque na remodelação do citoesqueleto impulsionada por RhoG e no tráfego de membranas. Por meio da regulação da dinâmica da actina, a SGEF influencia a adesão e migração celulares e processos endocíticos, conectando sinais a montante a mudanças coordenadas na forma e na polaridade celular. A sinalização de Rho dependente de ARHGEF26 interage com vias que controlam respostas de células inflamatórias e o comportamento da barreira epitelial, o que a torna relevante para estudos de sinalização imune, interações hospedeiro–patógeno e remodelação tecidual. A ativação desregulada de GTPases Rho e o controle alterado do citoesqueleto estão comumente associados a fenótipos oncogênicos e comportamento celular invasivo, posicionando a SGEF como um nó mecanístico para dissecar a biologia de doenças associadas à motilidade.
SGEF O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ARHGEF26 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ARHGEF26. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ARHGEF26. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ARHGEF26 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.