Selenoprotein P CRISPR/Cas9 KOプラスミド (bovine2): sc-437342

概要

セレノプロテインP（SELENOP）は、セレノシステイン残基に富む分泌性糖タンパク質で、哺乳類における主要なセレンの輸送・貯蔵因子として機能し、全身へのセレン分配とレドックス恒常性を支えています。セレン酵素の生合成に必要なセレンを供給することで抗酸化防御に寄与し、酸化ストレス、炎症、小胞体ストレスに対する細胞応答にも影響します。ウシの生物学においてSELENOPは、肝臓からの分泌、血管および代謝の調節、セレン依存性免疫に関与し、セレン状態を酸化損傷や炎症シグナル伝達と結び付けます。SELENOPの発現異常やセレン供給の不足／過剰は、レドックスシグナルの変化や代謝バランスの破綻と関連するため、ストレス適応経路や栄養—遺伝子相互作用を研究するうえで有用な分子学的切り口となります。

Selenoprotein P CRISPR/Cas9 KOプラスミド（bovine2）は、bovine細胞株における遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Selenoprotein Pタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Selenoprotein Pシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Selenoprotein Pの機能に不可欠なエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Selenoprotein P CRISPR/Cas9 KOプラスミド（bovine）およびSelenoprotein P CRISPR/Cas9 KOプラスミド（bovine2）によってコードされるgRNAは、遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Selenoprotein P HDRプラスミド（bovine）および Selenoprotein P HDRプラスミド（bovine2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定の標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。