Selenoprotein P Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (bovine2): sc-437342

Visão geral

A selenoproteína P (SELENOP) é uma glicoproteína secretada, rica em resíduos de selenocisteína, que atua como um dos principais fatores de transporte e armazenamento de selênio em mamíferos, sustentando a distribuição sistêmica de selênio e a homeostase redox. Ela contribui para a defesa antioxidante ao fornecer selênio para a biossíntese de selenoenzimas, influenciando as respostas celulares ao estresse oxidativo, à inflamação e ao estresse do retículo endoplasmático. Na biologia bovina, a SELENOP é relevante para a secreção hepática, a regulação vascular e metabólica e a imunidade dependente de selênio, conectando o estado de selênio ao dano oxidativo e à sinalização inflamatória. A expressão desregulada de SELENOP ou a disponibilidade de selênio está associada a alterações na sinalização redox e a desequilíbrio metabólico, tornando-a um ponto de partida molecular útil para estudar vias de adaptação ao estresse e interações nutriente–gene.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Selenoprotein P (bovine2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene em linhas celulares bovine. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do , juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Selenoprotein P.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de para a investigação da sinalização de Selenoprotein P, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) críticos para a função Selenoprotein P
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Selenoprotein P Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (bovine) e pelo Selenoprotein P Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (bovine2) têm como alvo locais distintos dentro do locus . Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Selenoprotein P Plasmídeo HDR (bovine) e o Plasmídeo HDR Selenoprotein P (bovine2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.