RMND5A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-413041

Übersicht

RMND5A (Required for Meiotic Nuclear Division 5 Homolog A) kodiert ein konserviertes Protein, das an der ubiquitinabhängigen Qualitätskontrolle von Proteinen beteiligt ist. Berichtet wurden Funktionen in E3-Ubiquitin-Ligase-assoziierten Prozessen, die die Proteostase und das Fortschreiten des Zellzyklus beeinflussen. Über Verbindungen zur Ubiquitinierung und zum Abbau regulatorischer Proteine wird RMND5A im Kontext von Stressantworten, Proliferationskontrolle und der Aufrechterhaltung der zellulären Homöostase untersucht. Störungen von Komponenten des Ubiquitin-Systems sind häufig mit Genominstabilität und veränderter Wachstums-Signalgebung verknüpft, wodurch RMND5A ein nützliches Ziel für mechanistische Studien zur fehlregulierten Proteostase in der Biologie menschlicher Erkrankungen darstellt.

Das RMND5A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des RMND5A-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des RMND5A-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von RMND5A nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die RMND5A-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von RMND5A-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der RMND5A-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf RMND5A-Exone abzielen, die für die RMND5A-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere RMND5A-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom RMND5A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom RMND5A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des RMND5A-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das RMND5A HDR-Plasmid (h) und RMND5A HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von RMND5A-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten RMND5A-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.