Rlf Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410980

Descripción general

RLF (RLF zinc finger) codifica Rlf, una proteína nuclear de unión al ADN implicada en la regulación transcripcional mediante su interacción con la cromatina y con elementos reguladores del ADN. Rlf contiene motivos de dedos de zinc compatibles con funciones en el control de programas de expresión génica que influyen en la progresión del ciclo celular, la diferenciación y el mantenimiento de la identidad celular. La regulación alterada de redes transcripcionales en las que participa RLF se ha asociado con un control proliferativo perturbado y otras anomalías de expresión génica relevantes para la biología de las enfermedades, lo que lo convierte en una diana útil para estudios mecanísticos en células humanas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Rlf (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RLF en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RLF junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RLF tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Rlf.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RLF para la investigación de la señalización de Rlf, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RLF críticos para la función de Rlf
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RLF para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Rlf CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Rlf CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RLF. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Rlf (h) y el plásmido HDR Rlf (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RLF para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RLF definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.