Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
RIP3 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-425224-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RIP3O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RIP3 (m) e o Plasmídeo Double Nickase RIP3 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ripk3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RIP3 Anticorpo (B-2): sc-374639
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RIP3 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-425224-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RIP3 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-425224-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Ripk3 de camundongo codifica a quinase de serina/treonina interagente com receptor 3 (RIP3), um regulador central da necrose programada (necroptose) e da sinalização inflamatória. A RIP3 coopera com RIP1 e MLKL para montar o necrossoma, promovendo a desestabilização da membrana e a liberação de padrões moleculares associados a dano (DAMPs), que amplificam as respostas imunes inatas. Essa via se intersecta com a sinalização do receptor de TNF, com as vias TLR/TRIF e com a comunicação cruzada com a apoptose e a ativação do inflamassoma, moldando a produção de citocinas e as respostas celulares ao estresse. A atividade desregulada de RIP3 tem sido implicada em modelos de lesão tecidual e inflamação, incluindo fenótipos neuroinflamatórios e metabólicos, tornando Ripk3 um alvo frequente em estudos mecanísticos sobre morte celular e homeostase imune.
RIP3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ripk3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ripk3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ripk3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ripk3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.