RENBP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-422648

Übersicht

Renbp kodiert das Renin-Bindungsprotein (RENBP), ein membranassoziiertes Protein, das an der Regulation von Komponenten des Renin–Angiotensin-Systems und verwandter proteolytischer Prozessierungswege beteiligt ist. In Mausgeweben wurde die RENBP-Expression mit der Modulation der Reninverfügbarkeit und nachgeschalteten Signalwegen in Verbindung gebracht, die den Gefäßtonus, die Elektrolythomöostase und Entzündungsreaktionen beeinflussen. Über diese Zusammenhänge ist Renbp für mechanistische Studien zur Blutdruckregulation und zu kardiometabolischen Stresssignalwegen relevant. Eine veränderte Renin–Angiotensin-Signalgebung ist zudem mit renaler und kardiovaskulärer Pathologie assoziiert, wodurch Renbp einen nützlichen Ansatzpunkt darstellt, um Gen-Netzwerke zu untersuchen, die die Proteasenregulation mit der systemischen Physiologie verknüpfen.

Das RENBP CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Renbp-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Renbp-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Renbp nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die RENBP-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Renbp-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der RENBP-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Renbp-Exone abzielen, die für die RENBP-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Renbp-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom RENBP CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom RENBP CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Renbp-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das RENBP HDR-Plasmid (m) und RENBP HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Renbp-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Renbp-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.