RBMX Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417339

Descripción general

La RBMX humana (RNA binding motif protein X-linked) es una proteína nuclear de unión a ARN que se asocia con transcritos nacientes y contribuye al empalme del pre-ARNm, la maduración del ARNm y la coordinación de la transcripción con el procesamiento del ARN. RBMX se ha vinculado al mantenimiento del genoma mediante funciones en la respuesta al daño del ADN y en procesos asociados a la replicación, lo que favorece la preservación de la integridad cromosómica durante la progresión del ciclo celular. A través de su participación en vías relacionadas con el espliceosoma y de la regulación de la producción de isoformas de transcritos, RBMX puede influir en programas de expresión génica que gobiernan la proliferación y las respuestas al estrés. Se ha descrito una desregulación de la expresión o la función de RBMX en contextos relacionados con el cáncer y el desarrollo, donde el procesamiento alterado del ARN y la inestabilidad genómica son características patogénicas comunes.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO RBMX (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RBMX en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RBMX junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RBMX tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RBMX.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RBMX para la investigación de la señalización de RBMX, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RBMX críticos para la función de RBMX
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RBMX para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido RBMX CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido RBMX CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RBMX. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RBMX (h) y el plásmido HDR RBMX (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RBMX para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RBMX definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.