RBM15 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417289

Descripción general

RBM15 (proteína 15 con motivo de unión a ARN) es un regulador de unión a ARN implicado en el control génico postranscripcional, incluida la alternancia de empalme (splicing), el procesamiento del ARNm y decisiones sobre el destino de los transcritos que determinan el estado celular. Se ha relacionado con la modificación del ARN y la regulación epitranscriptómica mediante interacciones con la maquinaria asociada a m6A, lo que influye en programas de metabolismo del ARN relevantes para la hematopoyesis y la diferenciación. RBM15 también se estudia en contextos transcripcionales y asociados a la cromatina que conectan el procesamiento del ARN con los resultados de expresión génica durante el desarrollo. La desregulación de RBM15 se ha asociado con vías relacionadas con neoplasias hematológicas y con alteraciones en el compromiso de linaje, lo que lo convierte en un objetivo útil para investigar mecanismos centrados en el ARN en la biología de las enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO RBM15 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RBM15 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RBM15 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RBM15 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RBM15.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RBM15 para la investigación de la señalización de RBM15, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RBM15 críticos para la función de RBM15
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RBM15 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido RBM15 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido RBM15 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RBM15. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RBM15 (h) y el plásmido HDR RBM15 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RBM15 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RBM15 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.