Ran BP-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422596

Visão geral

Ranbp2 codifica a Ran BP-2 (Nup358), um importante componente dos filamentos citoplasmáticos do complexo do poro nuclear, que coordena o transporte nucleocitoplasmático dependente da GTPase Ran e contribui para a homeostase do envelope nuclear. Como ligase E3 de SUMO, regula a SUMOilação de cargas específicas e participa de processos que incluem a progressão mitótica, a dinâmica dos microtúbulos e a proteostase. A Ran BP-2 também interage com vias que controlam a exportação de mRNA e as respostas ao estresse, conectando o transporte nuclear ao controle do ciclo celular e à adaptação celular. A desregulação do tráfego nucleocitoplasmático e da regulação dependente de SUMO tem sido associada a fenótipos neurodegenerativos e à alteração da sinalização imune, tornando Ranbp2 um alvo útil para estudos mecanísticos em modelos murinos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Ran BP-2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ranbp2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ranbp2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ranbp2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Ran BP-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ranbp2 para a investigação da sinalização de Ran BP-2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ranbp2 críticos para a função Ran BP-2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ranbp2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Ran BP-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Ran BP-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ranbp2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Ran BP-2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Ran BP-2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ranbp2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ranbp2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.