Rab11-FIP3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405735
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rab11-FIP3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Rab11-FIP3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rab11-FIP3 Anticorpo (6H6): sc-517043
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rab11-FIP3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405735 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RAB11FIP3 codifica a proteína 3 interagente com a família Rab11 (Rab11-FIP3), um efetor de Rab11 que coordena a função dos endossomos de reciclagem e o tráfego de membranas durante a citocinese. A Rab11-FIP3 ajuda a direcionar a reciclagem endocítica e o endereçamento de vesículas para o corpo intermediário (midbody), sustentando a abscisão e a progressão adequada do ciclo celular, e interage com rotas de transporte dependentes de RAB11 que moldam a reciclagem de receptores e a polaridade celular. Por meio do seu papel na dinâmica dos endossomos de reciclagem, a Rab11-FIP3 contribui para processos que influenciam a migração e a proliferação celular, tornando-a relevante para estudos de tráfego desregulado em fenótipos associados ao câncer. Alterações na expressão ou perturbações funcionais da Rab11-FIP3 também têm sido associadas a defeitos na divisão celular e em vias de remodelação de membranas que podem afetar a estabilidade genômica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Rab11-FIP3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RAB11FIP3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RAB11FIP3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RAB11FIP3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Rab11-FIP3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RAB11FIP3 para a investigação da sinalização de Rab11-FIP3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RAB11FIP3 críticos para a função Rab11-FIP3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RAB11FIP3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Rab11-FIP3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Rab11-FIP3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RAB11FIP3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Rab11-FIP3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Rab11-FIP3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RAB11FIP3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RAB11FIP3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.