Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) Rab 9A: sc-416915-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Rab 9A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Rab 9A (h) y el plásmido de doble nickasa Rab 9A (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RAB9A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Rab 9A Anticuerpo (Mab9): sc-53145
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Rab 9A | sc-416915-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Rab 9A | sc-416915-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RAB9A codifica la pequeña GTPasa Rab9A, un regulador clave del tráfico de los endosomas tardíos que favorece la clasificación y el transporte de cargamentos entre los endosomas y la red trans-Golgi. Al alternar entre los estados unidos a GDP y a GTP, Rab9A coordina eventos de gemación vesicular, motilidad y anclaje, importantes para el reciclaje de receptores, las vías relacionadas con los lisosomas y la homeostasis de membranas. La actividad alterada de Rab9A se ha vinculado con una desregulación del transporte endolisosomal y de procesos adyacentes a la autofagia, que con frecuencia están implicados en la biología de enfermedades neurodegenerativas e infecciosas y en la remodelación del tráfico intracelular asociada al cáncer. Estas funciones hacen de RAB9A una diana útil para estudios mecanísticos del transporte vesicular, la comunicación entre orgánulos y la proteostasis.
Rab 9A El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RAB9A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RAB9A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RAB9A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RAB9A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.