Plasmide Double Nickase (h) QTRT1: sc-413456-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) QTRT1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide QTRT1 Double Nickase (h) et le plasmide QTRT1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant QTRT1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: QTRT1 Antibody (D-7): sc-398918
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) QTRT1 | sc-413456-NIC | 20 µg | $410.00 |
QTRT1 code la sous-unité catalytique de la tRNA‑guanine transglycosylase, qui installe la queuosine à la position wobble (G34) de certains ARNt cytosoliques, modulant ainsi la fidélité du décodage des codons et la dynamique de la traduction. Par cette voie de modification des ARNt, QTRT1 contribue à la protéostasie et à l’adaptation cellulaire au stress en influençant la précision et l’efficacité de la synthèse protéique. La dérégulation des enzymes de modification des ARNt, dont QTRT1, a été associée à des programmes traductionnels altérés liés à la prolifération et à des phénotypes de réponse au stress, ce qui rend ce gène pertinent pour les études de biologie des ARN et de régulation métabolique. QTRT1 constitue donc une cible utile pour étudier de manière mécanistique comment les modifications de la base wobble affectent l’expression génique au niveau de la traduction.
QTRT1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus QTRT1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de QTRT1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de QTRT1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de QTRT1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.